生化分析儀雙試劑R1、R2消耗量不對等的解決辦法

2016-08-31

生化室日常工作中,大家會發現:在雙試劑測試項目中,總是R2用完了,而R1尚余很多,隨著檢驗次數的累積, 這種效應越加明顯,留下來的R1留之無用, 棄之可惜。


生化試劑R1、R2消耗量不對等的原因:


如果查閱儀器說明書,可以發現生化試劑在使用過程中是有損耗的,這種效應是由于儀器本身設計有試劑 ”取樣/ 富余量“所致,多數儀器都存在這種問題。 檢驗地帶網

儀器在試劑瓶轉移到反應杯的過程中,會多吸入大概5ul的量,R1、R2同樣的加試劑辦法,到最后會出現什么情況呢?以ALT試劑為例,規格R1為200ml,R2為50ml,正常情況下儀器參數設為:樣品20ul; R1為160ul,R2為40ul,實際吸試劑時,R2每次吸的量是45ul,這樣R2將在1111次測試后用完,而R1在1111*(160+5)次測試后,用量為183ml,富余量為17ml,相同批號試劑累積到5盒時,R1的富余量將是85ml。 檢驗地帶網

解決思路: www.labdd.com

在雙試劑測試中,R1 一般為緩沖液, R2為反應物質混合物。設想: 兩試劑按二種不同比例混合,其所含反應物成分、構成比不變,只是反應物濃度不同,而反應物濃度不同對測定中的反應實質沒有影響,只對反應的有效檢測線性范圍有影響;在樣品量不變的情況下,如果適當增加反應物濃度,其線性范圍變寬,濃度減低, 則線性范圍變窄;而如果同時將樣品量也減少一些,則僅是曲線的斜率略降低(靈敏度略降低),而線性范圍幾乎不受影響;對于酶類速率法測定來說,在沒有校準品時, 所提供的K 值有意義,不能輕易改動,而在有校準品時,K 值是可以調整的。

解決辦法:


如果處于節約試劑的考慮,如上例ALT項目可采取:R1 設定量不變,R2 新設定量為為36ul。樣品新設定量= 原設定量(20ul) *(36/40) = 18ul,用校準品重新定標。


結果: 檢驗地帶網

R2采用新設定量36ul,總的測試數變為1219次,比原先1111次增加了119次,增加了10%的測試數,即實現了節省試劑成本10%;理論上,犧牲了很小的檢測靈敏度,實際應用中,室間質評和室內質控都沒有影響。


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